学习园地6一种有利于脱脂的新型脱水和透明试剂-丁伟
- 分类:技术交流
- 作者:丁伟
- 来源:
- 发布时间:2022-06-17 10:10
- 访问量:
【概要描述】我用了一种新型脱水、透明试剂(北京九州柏林生物科技有限公司出品),常规 HE 质量与用传统酒精、二甲苯做出来的一致甚至更好, 如对于带有脂肪的组织蜡块更好切,脱脂效果更好,淋巴细胞核结构也更清 晰;免疫组化、FISH、基因检测也和用传统方法处理的组织无差异。
学习园地6一种有利于脱脂的新型脱水和透明试剂-丁伟
【概要描述】我用了一种新型脱水、透明试剂(北京九州柏林生物科技有限公司出品),常规 HE 质量与用传统酒精、二甲苯做出来的一致甚至更好,
如对于带有脂肪的组织蜡块更好切,脱脂效果更好,淋巴细胞核结构也更清
晰;免疫组化、FISH、基因检测也和用传统方法处理的组织无差异。
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- 作者:丁伟
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- 发布时间:2022-06-17 10:10
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一直以来,我对除酒精、二甲苯以外的脱水、透明剂持保留态度,因为无论常规HE还是免疫组化这些替代品的效果都没有用传统试剂方法做的好。然而最近我用了一种新型脱水、透明试剂(北京九州柏林生物科技 限公司出品),常规HE质量与用传统酒精、二甲苯做出来的一致甚至更好,如对于带有脂肪的组织蜡块更好切,脱脂效果更好,淋巴细胞核结构也更清晰;免疫组化、FISH、基因检测也和用传统方法处理的组织无差异。为了搞清楚柏林脱水液对脂肪的溶解情况,我们做了以下实验:
取相同重量的脱水油脂,分别加入无水乙醇、柏林脱水液、丙酮、二甲苯。
1分钟后二甲苯内的油脂迅速溶解,20分钟后柏林脱水液内的油脂溶解,30分钟时丙酮内的油脂溶解,12小时过去了,无水乙醇内的油脂体积无任何变化。因此,柏林脱水液作为一种复合的脱脂脱水剂,既能脱水又能脱脂。
我们经过一段时间在日常工作中应用后,性能稳定.现将脱水流程介绍如下:
脱水机前面的固定液和梯度酒精和传统试剂一致,最后一道无水酒精换成柏林脱水剂,二甲苯换成柏林透明液,具体如下:10%中性缓冲福尔马林(37℃、2小时)、75%酒精(37℃、2小时,处理1500个组织后更换试剂)、85%酒精(37℃、1.5小时,处理1500个组织后更换试剂)、95%酒精(37℃、1.5小时,处理1500个组织后第2道95%酒精前移)、95%酒精(37℃、1.5小时,处理1500个组织后更换试剂)、100%酒精(37℃、1小时,处理4500个组织后更换试剂)、柏林新型脱水剂(37℃、1小时,处理1500个组织后更换试剂)、柏林透明液(37℃、45分钟,处理1500个组织后更换试剂)、柏林透明液(37℃、45分钟,处理1500个组织后更换试剂))。然后浸蜡。(也有单位采用在处理1500块组织后将最后一道柏林脱水剂向前移的换液方式进行更换)。
结果如下:
传统方法肠组织
新型脱水透明剂方法肠组织
传统方法肝组织
新型脱水透明剂方法肝组织
传统方法子宫肌瘤组织
新型脱水透明剂方法子宫肌瘤组织
传统方法脂肪组织(脂肪细胞有破损)
新型脱水透明剂方法脂肪组织(脂肪细胞完整)
传统方法CK染色
新型脱水透明剂方法CK染色
传统方法HER2染色
新型脱水透明剂方法HER2染色
传统方法ER染色
新型脱水透明剂方法ER染色
传统方法PR染色
新型脱水透明剂方法PR染色
传统方法Ki-67染色
新型脱水透明剂方法Ki-67染色
传统方法E-cad染色
新型脱水透明剂方法E-cad染色
传统方法FISH染色
新型脱水透明剂方法FISH染色
基因重排、基因检测无差异。
从以上比对可以看出,柏林新型的脱水液在组织处理中能起到很好的脱水作用,能在脱水过程中脱去脂肪,可以提高常规切片的质量,对免疫组化染色和分子病理检测均无影响。因此柏林的脱水、透明试剂,可以替代最后一道无水酒精和透明试剂二甲苯,应用于日常工作中,起到很好的效果。
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